疏水層析也稱疏水作用層析(hydrophobic interaction chromatography HIC)。蛋白質(zhì)表面一般有疏水與親水基團(tuán),疏水層析是利用蛋白質(zhì)表面某一部分具有疏水性,與帶有疏水性的載體在高鹽濃度時(shí)結(jié)合。在洗脫時(shí),將鹽濃度逐漸降低,因其疏水性不同而逐個(gè)地先后被洗脫而純化,可用于分離其它方法不易純化的蛋白質(zhì)。
一般而言,離子強(qiáng)度(鹽濃度)越高,物質(zhì)所形成的疏水鍵越強(qiáng)。HIC配基基團(tuán)一般為丁基、苯基、辛基,其碳鏈分別為C4, C6(苯環(huán))和C8。一般來說,碳鏈越長,表面疏水性越高。影響疏水作用的因素包括:鹽濃度,溫度,pH,表面活化劑和有機(jī)溶劑。疏水層析的應(yīng)用與離子交換層析的應(yīng)用剛好互補(bǔ),因此,可以用于分離離子交換層析很難或不能分離的物質(zhì)。
疏水吸附過程圖
BioToolomics疏水層析填料產(chǎn)品:
(1)丁基疏水層析填料(Butyl SepFast Media):Butyl SepFast 4HF、Butyl SepFast 6HF、Butyl SepFast Large Beads
(2)苯基疏水層析填料(Phenyl SepFast Media):Phenyl SepFast 4HF、Phenyl SepFast 6HF、Phenyl SepFast 6HF High sub、Phenyl SepFast HighRes、Phenyl SepFast Large Beads
(3)辛基疏水層析填料(Octyl SepFast Media):Octyl SepFast 4HF、Octyl SepFast 6HF、Octyl SepFast Large Beads
BioToolomics疏水層析填料產(chǎn)品優(yōu)勢:
· 高樣本裝載能力;
· 高分離功率;
· 可提供從分析到全生產(chǎn)規(guī)模的所有包裝尺寸;
· 化學(xué)穩(wěn)定的瓊脂糖基質(zhì);
· 可在高和低配體密度、交替交聯(lián)水平和不同珠粒尺寸下生產(chǎn),以優(yōu)化分離介質(zhì);
· 所有版本都可以按比例放大并生產(chǎn),以供GMP使用;
· 比其他供應(yīng)商有更多的選擇。
BioToolomics疏水層析填料的選擇指南:
4HF serial (50 – 150 μm) | 6HF serial (50 – 150 μm) | Large Beads (150 – 350 μm) | HighRes (25 – 50 μm) |
絕大多數(shù)大分子蛋白 | 純化多肽或分子量較小的蛋白質(zhì) | 純化粘稠樣品中的蛋白質(zhì) | 純化高分辨率的蛋白質(zhì) |