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CellScript T7 ARCA加帽試劑盒代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,提供CellScript產(chǎn)品,如T7轉(zhuǎn)錄試劑盒、mRNA合成試劑盒、加帽試劑盒等,更多CellScript產(chǎn)品,歡迎選購!
CellScript公司介紹:
CELLSCRIPT的使命旨在為臨床研究和治療提供制造和使用RNA在細胞中翻譯的最佳產(chǎn)品和技術(shù)。
目前的產(chǎn)品包括用于體外轉(zhuǎn)錄的試劑盒、使用帽類似物或帽酶的5'RNA帽蓋和3'RNA多腺苷酸化,以及用于制造用于在細胞
中翻譯的帶帽多(a)尾mRNA的一體式試劑盒。
CELLSCRIPT引入INCOGNITO™ RNA轉(zhuǎn)錄試劑盒,用于體外合成含有修飾核苷的RNA,如假尿苷(Ψ)和/或5-甲基胞苷
(m5C)代替相應(yīng)的U或C規(guī)范核苷(圖1)。這些試劑盒之所以如此命名,是因為被封端的、聚腺苷酸化的和核苷修飾的
RNA產(chǎn)物(稱為“INCOGNITO mRNA")被wei裝,因此當(dāng)它們被轉(zhuǎn)染到表達各種RNA傳感器的哺乳動物細胞中時,它們
不會像相應(yīng)的未修飾的mRNA那樣誘導(dǎo)先天免疫反應(yīng)。
CellScript T7 ARCA加帽試劑盒介紹:
MessageMAX™ T7 ARCA封端信息轉(zhuǎn)錄試劑盒通過使用T7 RNA聚合酶和抗反向封端類似物(ARCA)m2 7,3'-OG[5']ppp[5]的體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生封端RNA。30分鐘,20μl MessageMAX反應(yīng)從1μg 1.4kb標準T7對照模板DNA中產(chǎn)生高達60μg ARCA封端的RNA。由于ARCA在m7G核苷酸上含有3'-O-甲基(圖1),因此在體外轉(zhuǎn)錄/封端反應(yīng)過程中,ARCA只能以正確的方向摻入RNA的5'端。1-3標準帽類似物(m7G[5']ppp[5']G)并非如此。因此,ARCA摻入導(dǎo)致帽狀RNA的合成,其在體內(nèi)比標準帽狀類似物更有效地翻譯。ARCA/NTP PreMix包含所有四種核糖核苷酸和ARCA。PreMix確保了每個NTP的最佳濃度和ARCA與GTP的比例(4:1),最大限度地提高了轉(zhuǎn)錄封端(~80%)和產(chǎn)量。由于GTP在反應(yīng)中的濃度是有限的,ARCA優(yōu)先作為轉(zhuǎn)錄物的第一個或5’-末端G結(jié)合。CELLSCRIPT還提供INCOGNITO™ T7 ARCA 5mC-&-RNA轉(zhuǎn)錄試劑盒,用于生產(chǎn)含5-甲基胞嘧啶-假尿苷的(GA m5C)ARCA封端的RNA。這種RNA已在Warren等人的里程碑式出版物中使用。(2010),成功地將多種人類細胞類型重新編程為誘導(dǎo)多能干細胞。4研究表明,與相應(yīng)的未修飾信使核糖核酸相比,-mRNA和5mCmRNA在表達各種RNA傳感器的人類和其他哺乳動物細胞中被翻譯成更高水平的蛋白質(zhì),并誘導(dǎo)更低的先天免疫反應(yīng)。
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